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Technical Data Sheet 2014〈05〉
技術資料（Technical Data Sheet）
RNase A（単体溶液ベース）での安定性試験
● 目 的： FastGene TM Xpress Plasmid PLUS Kit（Cat No. FG-90102P：2preps）に付属のRNase A 溶液50μL
（50mg/mL）の安定性を評価した。
※10, 25prep製品に付属のRNase Aは凍結乾燥粉末
● 評価方法： 4℃, 65℃で1週間保存したRNase Aを用いて、プラスミドを精製し、その収量と純度、およびゲル電気泳動によるバンドを
確認してRNase Aの安定性を評価した。このとき、コントロールとしてRNase Aを添加せずにプラスミドを精製したサンプ
ルも調製し、その結果を比較した。 ● 評価製品： FastGene TM Xpress Plasmid PLUS Kit（Cat No. FG-90102P：2preps）に付属のRNase A
使用機器と使用試薬
FastGene TM
Xpress Plasmid PLUS Kit
(Cat No. FG-90102P：2preps
FG-90202P：10preps
FG-90302P：25preps)
FastGene TM
Plasmid Mini Kit
(Cat No. FG-90402：100preps
FG-90502：300preps)
実験手順
① RNase Aを4℃, 65℃で1週間保存する。
（65℃, 1週間は室温（25℃）, 約1年間に相当すると定義した）
② プラスミド（pBR322：Low copy plasmid）を大腸菌BL21株にトランスフォーメーションし、培養後FastGene TM Plasmid Miniで精製する。
※このときに、RNase Aは①の条件で1週間保存したものを使用
※コントロールとしてRNase Aを添加せずにプラスミドを精製したサンプルも調製
③ 精製したプラスミドを用いて、核酸の収量と純度を測定する。
④ 精製したプラスミドを電気泳動し、バンドを確認する。
結果
レーン
1
2
3
4
5
6
RNase A
保存温度
mP1*への
RNase A添加
濃度(μg/mL)
-
0
4℃
100
65℃
100
4℃
核酸濃度
(ng/μL)
0
260/280
186.81
1.95
194.64
1.93
101.08
1.94
98.33
1.98
97.60
1.92
96.18
1.94
bp
M
1
65℃
100
2
3
100
4
5
6
10000
8000
6000
5000
● 泳動条件
サンプル量 5μL/well
1.5% TAE アガロースゲル
100V, 15min
4000
3000
* mP1は、FastGene Plasmid Mini Kitの再懸濁バッファー
（通常、RNase Aを添加して使用）
TM
1, 2 では
RNA が分解されずに
残っている
レーン 1, 2では残留RNAがあるため
収量濃度が高くなる傾向が見られる
● まとめ
FastGene TM Xpress Plasmid PLUS Kit（Cat No. FG-90102P：2preps）に付属のRNase Aは65℃で1週間保存しても
失活することなく十分に機能することがわかった。
以上の結果により、 FastGene TM Xpress Plasmid PLUS Kit（Cat No. FG-90102P：2preps）に付属のRNase Aは
室温（25℃）で約1年間保存しても十分に機能すると期待できる。
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2014OCT