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Synthetic Biology
CRISPR/Cas9 を用いた in vitro での
ゲノム編集のためのソリューション
SureGuide
効率的な部位特異的ゲノム切断により
クローニングなどが可能に
SureGuide Cas9 Nuclease Kit
●
gRNA の特異性を利用して DNA 断片の
クローニングなどに使用可能
●
gRNA コントロールが含まれているので
Cas9 活性を評価できます
精製 Cas9 酵素
SureGuide gRNA Synthesis Kit
●
転写反応から gRNA 精製までの試薬類を提供
●
IVT から UV/泳動確認まで最短 2.5 時間
精製 guide RNA
in vitro での SureGuide を用いた CRISPR/Cas9 のワークフロー
gRNA のデザインと
gRNA の IVT
テンプレート合成
および精製
●
SureGuide gRNA
Synthesis Kit
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in vitro での
Cas9 による切断
●
SureGuide Cas9
Nuclease Kit
切断した DNA を
利用した実験
目的部位の
切断評価
●
電気泳動
( TapeStation/
BioAnalyzer)
●
qPCR/PCR
●
シーケンス
●
クローニング
●
タンパク発現
など
5 Kb 以上の大きな DNA 断片のクローニング
SureGuide Cas9 Programmable Nuclease Kit は、カスタマイズで作製された gRNA と組み合わせて使用します。制限酵素を
用いる際の認識部位や PCR 正確性の制限を受けることがないため、これらでは困難な DNA を切断することができます。
平滑末端で切断するので、
マルチクローニングサイトを気にせずにベクターに組み込むことが可能になります。
❶ Cas9 によるターゲット DNA 切断
PAM sites
5’
3’
❷ 脱リン酸化(SAP)
❸ ゲルから DNA 断片を分離
3’
5’
❹ StrataClone vector でクローニング
5 kb
2 kb
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
2 種類の制限酵素で切断し、泳動結果を確認すると、
10レーン全てで正確にバンドパターンが得られ、
同じ配向を示しました
数量
価格(税抜)
酵素と
バッファ
gRNA
control
IVT
SureGuide CRISPR/Cas Complete Kit, 40 rx
1
82,000 円
●
●
●
5190-7715
SureGuide Cas9 Nuclease Kit, 20 rx
1
26,000 円
●
●
5190-7716
SureGuide Cas9 Nuclease Kit, 100 rx
1
55,000 円
●
●
5190-7717
SureGuide Cas9 Nuclease, 100 rx
1
39,000 円
●
5190-7718
SureGuide gRNA Control Kit, 20 rx
1
20,000 円
5190-7719
SureGuide gRNA Synthesis Kit, 50 rx
1
52,000 円
型番
5190-7714
品名
販売店
●
●
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本社 / 〒 192-8510 東京都八王子市高倉町 9-1
●カストマコンタクトセンタ 7 0120-477-111
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©Agilent Technologies, Inc. 2014
Printed in Japan. Nov. 20, 2014
5991-5332JAJP
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