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SuperScript IV
®
Reverse Transcriptase
10 分間 で全てを転写します。
SuperScript® IV 逆転写酵素（RT）は、SuperScript® III RTの
高性能な品質を全て兼ね備え、さらに確実性を高めるように
改良された新しい逆転写酵素です。
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先着300名様
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ご覧ください。
反応阻害剤に対する高い耐性
反応時間はわずか10 分
高い熱安定性（最大 55℃）
広範囲の種類のサンプルからの特異的なcDNA合成
反応阻害剤の存在下でも高効率で確実性の高い逆転写反応が行えるように改良されました。
RNAサンプル中に高頻度で含まれる反応阻害成分は、cDNA合成に干渉し、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-qPCR）の結果に偽陰性を生じ
させる可能性があります。反応阻害剤としては、RNA 抽出工程で使用された試薬、あるいは胆汁酸塩やフミン酸などの生物学的サンプル由来
の成分が考えられます（表1）。SuperScript® IV RTは、SuperScript® III RTや他社RT製品に比べて、混入している阻害物質に対して顕著な耐
性を示します（図1）。ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）RNAのような精製度の低いサンプルでも明確な結果を得られます。
Biological
inhibitors
Sample Prep
inhibitors
表1. 逆転写反応の阻害剤
T
Q
50 ng/µL humic acid 0.5% TRIzol® Reagent
SSIII
SSIV
P
N
SSIII
SSIV
P
N
T
Q
T
Size (kb)
8
6
SSIII
SSIV
P
N
Q
0.05% bile salts
SSIII
SSIV
P
N
T
Q
No
inhibitors
4
3
2
1.5
1
0.5
図1. 生物学的サンプルおよびサンプル調製液に含まれる阻害剤の存在下における
一本鎖cDNA合成の解析
500ngの0.5–10 kb RNA Ladder（製品番号 15623200）を鋳型として、
oligo（dT）20プライマーと10µL SuperScript® III（SSIII）またはSuperScript® IV
（ SSIV ）を用いて、添付のプロトコールに従い、逆転写反応を行った。他社 RT 製品
については製造元の推奨プロトコールに従った。阻害剤は、プライマーのアニーリ
ングおよびRT Reaction Mix添加を行う前にトータルRNAに添加した。一本鎖
cDNAは、アルカリゲル電気泳動およびSYBR® Gold Nucleic Acid Gel Stain
（製品番号 S11494）
による染色により確認した。全てのRNAはNaOHを用いて
加水分解し、cDNAのみを可視化した。
阻害剤
エタノール/イソプロパノ―ル、塩、
フェノール/クロロホルム、界面活性剤
由来
サンプル調製液
へパリン、ヘマチン、胆汁酸塩
血液、糞便
フミン酸、ポリフェノール、多糖
土壌、植物
ホルマリン、パラフィン
FFPE
逆転写困難なRNAサンプルや分解されたRNAからも感度と再現性に優れたcDNA合成が可能
理想的な逆転写酵素は、植物由来のRNAサンプル（通常分解されており、RNA 転写産物のコピー数が少なくなります）などの最も逆転写困難なタイプ
のRNA からの逆転写反応も可能とします。SuperScript® IV RTは確実性および感度が非常に高いため、RNA 分解物だけでなく生体サンプルから未精
製のRNAも逆転写検出することが可能です。 B
0.8
0.4
0.2
0
SSIII
SSIV
P
T
BR
Q
N
25S/28S →
18S→
0.6
SSIII
SSIV
P
T
BR
Q
N
Wheat germ
RIN >8
Flax seeds
RIN 1–3
Normalized RT efficiency
A
EF1A
Wheat germ
ETIF5A
Flax seeds
5S→
図2. SuperScript® IV RT の使用で分解RNAからの
反応効率が向上
（ A ）異なるサンプル由来の 500ng のトータル RNA の
1.2% E-Gel® アガロースゲル電気泳動結果。インタクト
なリボソームRNAは高品質なRNA（RIN>8）であること
が示された。Agilent Bioanalyzer™ による分析の結果、
それ以外の全てのRNAサンプルのRINスコアは1∼3で
あった。
（B）分解されたトータルRNAのRTqPCR解析。
分解された RNA（ 100ng ）を鋳型として、20µL の
SuperScript® IV をランダムヘキサマーとともに用いて、
添付のプロトコールに従い逆転写反応を行った。他社RT
製品については製造元の推奨プロトコールに従った。
各逆転写酵素による反応で得られた cDHA 生成液の
10%をEXPRESS qPCR Supermix, Universal（製品
に加え、EF1AおよびETIF5A遺伝子を
番号 1178501K）
ターゲットとして、TaqMan® アッセイを行った。各ターゲ
ット遺伝子について、CT値はSuperScript® IV RT サン
プルで得られたCT値に対して標準化した。
SuperScript® IV First-Strand Synthesis System
必要な試薬がそろった便利なキットです。 Ordering information
製品名
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製品番号
価格*
SuperScript IV Reverse Transcriptase
2,000 units
18090010
¥ 13,100
SuperScript IV Reverse Transcriptase
10,000 units
18090050
¥ 53,700
SuperScript® IV Reverse Transcriptase
4 × 10,000 units
18090200
¥ 170,000
SuperScript IV First-Strand Synthesis System
50 rxns
18091050
¥ 79,200
SuperScript IV First-Strand Synthesis System
200 rxns
18091200
¥ 269,300
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* 記載の価格は2015年3月現在の価格です。消費税は含まれておりません。価格は予告なしに変更する場合がありますので予めご了承ください。
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