B-cell ELISpot

B-cell ELISpot イムノグロブリン & B細胞応答研究ツール
ELISpot のヒントとコツ、
溶液サンプル中の抗体反応を測定するために
技術情報をコスモ・バイオウェブ上で紹介しています。
デザインされたアッセイはたくさんありますが、
http://www.cosmobio.co.jp/ELISpot
抗体分泌細胞(antibody-secreting cell;ASC)
そのものにフォーカスしたアッセイの数はわずか
です。その中のひとつが B-cell ELISpot キットです。
図 2. B-cell ELISpot の原理
ELISpot 技術をお使いいただける研究
1
1)キャプチャー抗 Ig 抗体を 96 ウェル ELISpot
プレートに固相化
● 液性免疫研究
● ワクチンで誘導された抗体応答
2-4)細胞を加えインキュベーションし、分泌抗体をキャ
プチャー抗体に結合させる
● B 細胞が分泌する異なるアイソタイプ
抗体の測定
5)細胞を除去後、ウェルにビオチン標識抗原(抗原特異
的細胞の検出)(B)あるいはビオチン標識抗 Ig 抗体
(すべての抗体分泌細胞の検出)(C)を加える
ELISpot はサンプル中の抗体分泌細胞と抗
2
6-7)ストレプトアビジン - 酵素、基質を加えてスポッ
トを可視化
8) 顕微鏡あるいは ELISpot リーダーでス
ポットを評価・数値化
原特異的抗体分泌細胞の高感度な測定と同定
3
の両方が可能です(図 1)。
ヒト、サル、マウスサンプルの異なるアイソタイプの
B 細胞分泌抗体の解析用キットと抗原特異的抗体分泌細胞検出
4
システムをご用意しています。
さらに従来法のプロトコールを改良して、抗原をプレートに固定化するので
B
はなく、抗 Ig 抗体をコートして、抗原はビオチン化して検出に使用すること
B
B
B
B
B
B
5
B
が可能です(図 2)。
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
B
E
B
ストレプト
アビジン- 酵素
B
C
E
E
E
C
E
E
A
E
E
E
E
B
E
E
A
E
E
E
E
E
E
E
B
B
B
B
ビオチン化
抗Ig抗体
B
ビオチン化
抗原
B
B
B
B
B
B
E
E
B
抗原特異的IgG
Ig ELISpot
ELISpot
Antigen-specific
B
B
B
細胞から分泌
されたIg
抗原
B
E
E
E
B
6
E
B
B
E
B
E
E
B
B
B
キャプチャー用
抗Ig抗体
B
B
E
B
E
E
E
B
B
E
B
B
7
E
B
E
E
B
B
B
トータル
ELISpot
TotalIgIgG
ELISpot
8
図 1. 抗原特異的 B-cell ELISpot の 2 つの手法の図式化
(A) 抗原を固相化に使用 (B) 抗原をビオチン標識して* 検出に使用
図の例では Ig 産生細胞に限定した解析を示し、Ig 分泌細胞の総数は (C) で示すように定量
する。 *B-Cell ELISpot キットにビオチン標識キットは含まれておりません。
Antigen-specific (B)
Total Ig (C)
B-cell ELISpot イムノグロブリン&B 細胞応答研究ツール
構成内容
●キャプチャー抗体
●基質(BCIP/NBT-plus または TMB)
●ビオチン標識検出抗体
●白色 ELISpot プレート
●ストレプトアビジン -ALP または -HRP
●リコンビナント IL-2 *
*メモリー B 細胞の刺激処理用試薬入り
(品番 3810-2AW-Plus と 3810-2HW-Plus には
CD40 抗体とリコンビナント IL-4 が含まれます)
●R848 *
商品リスト
Mabtech AB メーカー略号:MAB
品名
適用種
kit
Human IgA ELISpot
PLUS
kit
Human IgE ELISpot
PLUS
Human IgM ELISpot
PLUS
Monkey IgA ELISpot
PLUS
Mouse IgA ELISpot
PLUS
Mouse IgG ELISpot
kit
kit
kit
PLUS
Mouse IgM ELISpot
Human
kit
Human IgG ELISpot
PLUS
PLUS
Human
品番
希望販売価格
ALP
4 プレート分 **
3860-2AW-Plus
¥102,000
HRP
4 プレート分 **
3860-2HW-Plus
¥102,000
ALP
4 プレート分 **
3810-2AW-Plus
¥128,000
4 プレート分 **
3810-2HW-Plus
¥128,000
Human,
ALP
4 プレート分 **
3850-2AW-Plus
¥102,000
Monkey
HRP
4 プレート分 **
3850-2HW-Plus
¥102,000
Human
Monkey
Mouse
kit
包装
HRP
Mouse
kit
検出
Mouse
ALP
4 プレート分 **
3840-2AW-Plus
¥128,000
HRP
4 プレート分 **
3840-2HW-Plus
¥128,000
ALP
4 プレート分 **
3860M-2AW-Plus
¥82,000
HRP
4 プレート分 **
3860M-2HW-Plus
¥82,000
ALP
4 プレート分 **
3835-2AW-Plus
¥128,000
HRP
4 プレート分 **
3835-2HW-Plus
¥128,000
ALP
4 プレート分 **
3825-2AW-Plus
¥102,000
HRP
4 プレート分 **
3825-2HW-Plus
¥102,000
ALP
4 プレート分 **
3845-2AW-Plus
¥128,000
HRP
4 プレート分 **
3845-2HW-Plus
¥128,000
** 白色プレート
ELISpot が気になる方には、このカタログがオススメ!
マブテック社の ELISpot キットを中心に、全商品を掲載した日本語カタログです。
原理やアプリケーション例、FAQ も掲載しています。
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