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および7.5%濃度追加！
6%および
および
濃度追加！
りん酸化タンパク質研究用ポリアクリルアミドゲル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ シリーズ
Phos-tagⓇ アクリルアミドを重合させたタンパク質電気泳動用プレキャストゲルです。SDS-PAGE中にゲルに含まれるPhos-tagⓇが
りん酸化タンパク質を捕捉し、りん酸化タンパク質の泳動速度を遅らせます。これにより、りん酸化タンパク質と非りん酸化タンパク質
を異なるバンドとして検出できます。
＊本品は電気泳動槽「イージーセパレーターTM」とご使用ください。
●製品仕様
スーパーセップTM Phos-tagⓇ
イージーセパレーターTM
Phos-tag SDS-PAGEの原理
の原理
りん酸化タンパク質と非りん酸化タンパク質とでは、ほと
んど分子量が変わらないないため、通常のSDS-PAGEで
それらを分離することは困難です。
Phos-tagが含まれたゲルでSDS-PAGE(Phos-tag SDSPAGE)を行うと、りん酸化タンパク質はそのりん酸化の程
度に応じて泳動速度が遅くなります。
りん酸化状態の経時変化
●方法 ヒト肺ガン由来Lu99細胞にX線(5Gy)を照射し、経時的に
細胞を回収した。細胞抽出液を調製し、スーパーセップTM PhostagⓇ (50μmol/l), 10%, 13ウェルを用いてSDS-PAGEを行った。
ゲルを10mmol/l EDTAを含むトランスファーバッファーで振とう
後、PVDF膜へ転写した。メンブレンは、2%Milk/TBS-Tでブロッキ
ングした後、一次抗体と反応させた（上段：p53, 下段：細胞周期関
連タンパク質）。検出は化学発光試薬を用いて行った。
東京大学大学院医学系研究科 疾患生命工学センター
放射線分子医学部門 榎本助教提供
●結果 p53は、X線照射により、タンパク質の蓄積が4時間後を
ピークに見られた。プロテインXは、X線照射により、りん酸化の状
態が変化することがわかった。
コントロールタンパク質の泳動
●泳動条件 ： 30mA/ゲル（定電流）, 60分
●サンプル ： 5μg/lane α-カゼイン, ウシ乳由来とその脱りん酸化物の混合物
（コードNo. 038-23221)
●サンプルバッファー ： Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (コードNo. 19113272)
●ランニングバッファー ： SDS-PAGE バッファー, pH8.5(コードNo. 192-16801)
●染色 ： クイックCBBプラス(コードNo. 174-00553)
α-カゼイン
α-カゼイン, 脱りん酸化
P10%(左) ： スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 10%, 13ウェル
P15%(中) ： スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 15%, 13ウェル
A15%(右) ： スーパーセップTMエース, 15%, 13ウェル
P10%
P15%
A15%
Phos-tag SDS-PAGEに関する注意点
1.
2.
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ゲル濃度が低くなるに伴い、ゲルが柔らかくなります。ゲルスクレイパーを使用するなど慎重にお取り扱いください。
サンプル中にEDTA、バナジン酸が含まれていると著しくバンドが歪む恐れがあります。ホスファターゼ阻害剤をご使用の場合は、これら
が含まれていないものをご使用ください。また、無機塩類や界面活性剤もバンドの歪みの原因となることがあります。TCA沈殿や透析処
理を行うことで改善されます。
ゲルに空レーンがあるとバンドが歪みやすくなります。空レーンにはサンプルと同量の1×サンプルバッファーをアプライしてください。
転写に関する注意点
転写前に操作が1ステップ加わります。転写効率を上げるため、転写の前にキレート剤（EDTA）によりゲルから金属イオンを除
去する必要があります。金属イオンの除去が不十分であると、転写効率が著しく低下します。
電気泳動後、ゲルを1～10mmol/l EDTAを含む転写バッファー（メタノール不含）に浸し、ゆっくりと振とうしてください（例：
10分間×3回）。
ゲルをEDTAを含まない転写バッファー（メタノール含有）に浸し、ゆっくりと振とうしてください（例：10分間×1回）。
2.
3. 転写を行ってください。
注意 ：スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 6%、7.5%、10%はメタノールを含むバッファー中で浸とうすると、ゲルが白
くなりますが、品質に問題はありません。
：ウェット式の転写装置を推奨しますが、セミドライ式転写装置でも転写可能です。
：電気泳動後のゲルをEDTAを含む転写バッファーで振とうする際、振とう時間を延長することで転写効率が改善される
ことがあります。
1.
価格表
コードNo.
192-17401
199-17391
195-17371
192-17381
193-16711
190-16721
195-16391
193-16571
193-16691
196-16701
197-16851
194-16861
058-07681
038-23221
034-23223
品名
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 6%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 6%, 17ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 7.5%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 7.5%, 17ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 10%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 10%, 17ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 12.5%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 12.5%, 17ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 15%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 15%, 17ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 17.5%, 13ウェル
スーパーセップTM Phos-tagⓇ (50μmol/l), 17.5%, 17ウェル
イージーセパレーターTM
α-カゼイン, ウシ乳由来, 脱りん酸化
α-カゼインと脱リン酸化α-カゼインとの混合物です。
規格
電気泳動用
生化学用
容量
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
5枚
1セット
1mg
10mg
希望納入価格（円）
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
30,000
52,000
5,000
15,000
保管
収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。
掲載内容は、2014年10月時点での情報です。上記以外の法律および最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
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