抗体アレイ及び抗体固定化用基板のご紹介 住友ベークライト株式会社 S-バイオ事業部 -1- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 抗体アレイ及び抗体固定化用基板の特長 当社独自の低吸着表面処理技術に より低いバックグランドを提供します。 ⇒ 高S/N比。 ブロッキング剤(BSA,スキムミルクなど)の 選定の手間が不要です。 抗体固定化用基板 バラツキのない安定したバックグランド を提供します。 (スライドガラス形状) 基板は表面処理方法が異なる3種 の中よりお選び頂けます。 →簡便に、かつ高感度に タンパク質の発現解析が可能 -2- 抗原抗体反応の蛍光検出例 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 低吸着表面処理技術とは? 1. 非特異的吸着が抑制される 2. DNA, タンパク質等の生体関連分子の固定化が可能 3. 固定化された生体関連分子の活性が維持される 表面の断面構造(模式図) AFM 画像 1 : Control 2 : TGF-b 3 : Erythropoietin 4 : Histone H1 固定化用官能基 1 1 2 2 5μm 低吸着 ポリマー層 3 3 プラスチック基板 4 4 通常の 低吸着表面処理された ポリプロピレン ポリプロピレン -3- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 特長1:低いバックグラウンド ● 抗原抗体反応によるシグナル/バックグラウンド値の比較(社内評価例) 当社抗体固定化用基板(BS-X1344) Ag+ Ag- 他社製抗体固定化用基板(ガラス) Ag+ Ag- 他社製 抗体固定化用 基板 【評価条件】 ・ 固定化抗体 : 抗マウス IgG2a 抗体 (濃度 : 3.3mmol/L) ・ タンパク質 : Cy3標識マウス IgG2a + Cy3標識FBS(ダミータンパク) (IgG2a濃度 : 19nmol/L, FBS濃度 : 市販品の35倍希釈程度) バックグランドが低い為、高S/Nを得る事が可能です。 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. -4- 特長2:感度が高く、スポット形状が安定 他社製品(メンブレン) Antigen conc. 当社製品(BS-X1344) (ng/ml) 100 1 0 PMT=60, Laser=90 PMT=35, Laser=90 PMT=60, Laser=90 項目 当社製品 他社製品 感度 1ng / mL >1ng /mL スポット形状 丸 丸でない -5- (社内評価例) SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 特長3:ヒト血清中の複数成分を同時に検出 IL-1b IL-6 ヒトアルブミン 【評価条件】 ・ 固定化抗体:抗ヒト IL-1b 抗体 (濃度:3.3mmol/L) 抗ヒト IL-6 抗体 (濃度:3.3mmol/L ) 抗ヒトアルブミン抗体 (濃度:3.3mmol/L ) ・ タンパク質:ヒト血清 (含有タンパク濃度:0.16g/dL) 血清中成分の非特異吸着を抑制する為、特異的にタンパク質を検出 -6- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 応用例1:ヒトサイトカインチップ スポット概要 CCD カメラによるスポット後の画像 蛍光スキャナによる測定画像 9mm 9mm 計13種類の抗体をスポット (各抗体 5 スポット) 14000 検量線から計算した各サンプル中のサイトカイン濃度 ※ 測定機器 : CRBIO IIe (日立ソフトウェア社製) 測定条件 : PMT : 70, Laser : 90 Concentration (pg/mL) 12000 10000 8000 6000 4000 2000 スライドアレイだけでなく、少量検体向きウェルア レイもラインナップ。 血清および血漿中のサイトカイン13種類のプロ ファイリング解析を実施。サイトカイン動態解析 の可能性を示唆。 -7- 1. I L1β 2. I L3. I 2 L4 4. I L5 5. I L6 6. I L8 7. I L10 8. I L1 3 9. I L1 0. 18 GCS 1 1. F MIP -1β 1 2. TN F-α 1 3. IFN -γ 0 Plasma 25x Plasma 100x Serum 25x Serum 100x SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 応用例2:アレルゲンの定量 100000 Signal intensity (PMT : 60, Laser : 90) Antibody concentration : 0.975 mg/mL Antibody concentration : 0.244 mg/mL Antibody concentration : 0.061 mg/mL 10000 1000 100 0.1 1 10 100 1000 10000 Allergen protein concentration (ng/mL) 【評価条件】 抗アレルゲンタンパク抗体を濃度を変えてスポットし、 濃度の異なる Cy3標識した検体(アレルゲンタンパク)と反応。 抗原濃度依存性を確認 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. -8- 抗体固定化用基板 特徴一覧表 基板品番 結合様式 固定化の特徴 非特異吸着抑制能の特徴 BS-X1343 化学結合 ・共有結合により強固に抗体を固定化できる ・固定化された抗体が配向性を持つことがある 特に細胞溶解液では非特異 吸着量が少ない傾向がある。 BS-X1344 化学結合 ・共有結合により強固に抗体を固定化できる ・固定化された抗体が配向性を持つことがある ヒト血清でも非特異吸着量が 少ない。 BS-X1345 物理吸着 ・物理吸着によりランダムに抗体が固定化される為 抗体が配向性を持たない ヒト血清でも非特異吸着量が 少ない。 抗体種や反応系に応じた様々な表面処理を施した基板をご 用意しております。 抗体アレイ作製を検討されている方、まずはご一報下さい。 -9- SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. 抗体固定化用基板製品表 キット内容 •スライド基板 •スポッティング液 4mL •ブロッキング液A 250mL •ブロッキング液B 2.5mL •洗浄液 250mL •プロトコル 品番 品名 結合様式 非特異吸着抑制 枚/ケース 希望小売 価格(税別) BS-X1343 抗体アレイ用基板 化学結合 細胞内タンパク質等 25 100,000円 BS-X1344 抗体アレイ用基板 化学結合 血清内タンパク質等 25 100,000円 BS-X1345 抗体アレイ用基板 物理吸着 血清内タンパク質等 25 100,000円 - 10 - SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD. お問い合わせ先 住友ベークライト株式会社 S-バイオ事業部 マーケティング・営業部 担当 : 五十嵐 E-mail : [email protected] TEL - 11 - : 03-5462-4831 SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
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