抗体アレイ - 住友ベークライト

抗体アレイ及び抗体固定化用基板のご紹介
住友ベークライト株式会社
S-バイオ事業部
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SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
抗体アレイ及び抗体固定化用基板の特長
 当社独自の低吸着表面処理技術に
より低いバックグランドを提供します。
⇒ 高S/N比。
 ブロッキング剤(BSA,スキムミルクなど)の
選定の手間が不要です。
抗体固定化用基板
 バラツキのない安定したバックグランド
を提供します。
(スライドガラス形状)
 基板は表面処理方法が異なる3種
の中よりお選び頂けます。
→簡便に、かつ高感度に
タンパク質の発現解析が可能
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抗原抗体反応の蛍光検出例
SUMITOMO BAKELITE CO.,LTD.
低吸着表面処理技術とは?
1. 非特異的吸着が抑制される
2. DNA, タンパク質等の生体関連分子の固定化が可能
3. 固定化された生体関連分子の活性が維持される
表面の断面構造(模式図)
AFM 画像
1 : Control
2 : TGF-b
3 : Erythropoietin 4 : Histone H1
固定化用官能基
1
1
2
2
5μm
低吸着
ポリマー層
3
3
プラスチック基板
4
4
通常の
低吸着表面処理された
ポリプロピレン
ポリプロピレン
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特長1:低いバックグラウンド
● 抗原抗体反応によるシグナル/バックグラウンド値の比較(社内評価例)
当社抗体固定化用基板(BS-X1344)
Ag+
Ag-
他社製抗体固定化用基板(ガラス)
Ag+
Ag-
他社製
抗体固定化用
基板
【評価条件】
・ 固定化抗体 : 抗マウス IgG2a 抗体 (濃度 : 3.3mmol/L)
・ タンパク質 : Cy3標識マウス IgG2a + Cy3標識FBS(ダミータンパク)
(IgG2a濃度 : 19nmol/L, FBS濃度 : 市販品の35倍希釈程度)
バックグランドが低い為、高S/Nを得る事が可能です。
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特長2:感度が高く、スポット形状が安定
他社製品(メンブレン)
Antigen conc. 当社製品(BS-X1344)
(ng/ml)
100
1
0
PMT=60, Laser=90
PMT=35, Laser=90 PMT=60, Laser=90
項目
当社製品
他社製品
感度
1ng / mL
>1ng /mL
スポット形状
丸
丸でない
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(社内評価例)
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特長3:ヒト血清中の複数成分を同時に検出
IL-1b
IL-6
ヒトアルブミン
【評価条件】
・ 固定化抗体:抗ヒト IL-1b 抗体 (濃度:3.3mmol/L)
抗ヒト IL-6 抗体 (濃度:3.3mmol/L )
抗ヒトアルブミン抗体 (濃度:3.3mmol/L )
・ タンパク質:ヒト血清 (含有タンパク濃度:0.16g/dL)
血清中成分の非特異吸着を抑制する為、特異的にタンパク質を検出
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応用例1:ヒトサイトカインチップ
スポット概要
CCD カメラによるスポット後の画像
蛍光スキャナによる測定画像
9mm
9mm
計13種類の抗体をスポット
(各抗体 5 スポット)
14000
検量線から計算した各サンプル中のサイトカイン濃度
※ 測定機器 : CRBIO IIe (日立ソフトウェア社製)
測定条件 : PMT : 70, Laser : 90
Concentration
(pg/mL)
12000
10000
8000
6000
4000
2000
 スライドアレイだけでなく、少量検体向きウェルア
レイもラインナップ。
 血清および血漿中のサイトカイン13種類のプロ
ファイリング解析を実施。サイトカイン動態解析
の可能性を示唆。
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1. I
L1β
2. I
L3. I 2
L4
4. I
L5
5. I
L6
6. I
L8
7. I
L10
8. I
L1
3
9. I
L1 0.
18
GCS
1 1.
F
MIP
-1β
1 2.
TN
F-α
1 3.
IFN
-γ
0
Plasma 25x
Plasma 100x
Serum 25x
Serum 100x
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応用例2:アレルゲンの定量
100000
Signal intensity
(PMT : 60, Laser : 90)
Antibody concentration : 0.975 mg/mL
Antibody concentration : 0.244 mg/mL
Antibody concentration : 0.061 mg/mL
10000
1000
100
0.1
1
10
100
1000
10000
Allergen protein concentration (ng/mL)
【評価条件】
抗アレルゲンタンパク抗体を濃度を変えてスポットし、 濃度の異なる
Cy3標識した検体(アレルゲンタンパク)と反応。
抗原濃度依存性を確認
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抗体固定化用基板 特徴一覧表
基板品番
結合様式
固定化の特徴
非特異吸着抑制能の特徴
BS-X1343
化学結合
・共有結合により強固に抗体を固定化できる
・固定化された抗体が配向性を持つことがある
特に細胞溶解液では非特異
吸着量が少ない傾向がある。
BS-X1344
化学結合
・共有結合により強固に抗体を固定化できる
・固定化された抗体が配向性を持つことがある
ヒト血清でも非特異吸着量が
少ない。
BS-X1345
物理吸着
・物理吸着によりランダムに抗体が固定化される為
抗体が配向性を持たない
ヒト血清でも非特異吸着量が
少ない。
 抗体種や反応系に応じた様々な表面処理を施した基板をご
用意しております。
 抗体アレイ作製を検討されている方、まずはご一報下さい。
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抗体固定化用基板製品表
キット内容
•スライド基板
•スポッティング液
4mL
•ブロッキング液A 250mL
•ブロッキング液B 2.5mL
•洗浄液
250mL
•プロトコル
品番
品名
結合様式
非特異吸着抑制
枚/ケース
希望小売
価格(税別)
BS-X1343
抗体アレイ用基板
化学結合
細胞内タンパク質等
25
100,000円
BS-X1344
抗体アレイ用基板
化学結合
血清内タンパク質等
25
100,000円
BS-X1345
抗体アレイ用基板
物理吸着
血清内タンパク質等
25
100,000円
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お問い合わせ先
住友ベークライト株式会社
S-バイオ事業部
マーケティング・営業部
担当 : 五十嵐
E-mail : [email protected] TEL
- 11 -
: 03-5462-4831
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