Application No. L2103 ロイコトリエン類の一斉分析 Analysis of Leukotrienes by LC/MS/MS ロイコトリエン(LT)はアラキドン酸から生合成される生理活性物質で、その中でもアミノ酸が結合したLTC4、LTD4及 びLTE4は喘息と深く関連しています。ここではLTsとその代謝物を液体クロマトグラフィー/質量分析法(LC/MS/ MS)により、高感度分析に最適なMRMモードで一斉分析を行いました。 キーワード : ロイコトリエン; 代謝物; LC/MS/MS; 多重反応モニタリング Key words : Leukotrienes; Metabolites; Liquid Chromatography/Mass spectrometry; Multiple Reaction Monitoring (MRM); UHPLC Column : L-column2 ODS (USP category : L1) Sample : 1. 20-COOH-LTB4 5. LTC4 2. 20-OH-LTB4 3. LTD4 6. LTF4 7. LTB4 4. LTE4 8. 12-Keto-LTB4 in C2H5OH/H2O (50/50) (0.5 mg/L each) [Analytical conditions] Column : L-column2 ODS (C18, 2μm, 12 nm) Column size : 2.1 mm I.D. ×150 mm L. Mobile phase : A: CH3CN; B: 0.1% HCOOH in H2O A/B, 30/70-80/20 (0-30 min) Flow rate : 0.4 mL/min Temperature : 40℃ Detection : ESI-MS(-) Inj. Vol. : 2 μL System : LC: Ultimate 3000 Bio RS (Thermo Fisher Scientific K.K.); MS/MS: 3200 Q TRAP (AB Sciex) ■ロイコトリエン類の一斉分析 3 1 4, 5 6 2 7 8 Fig. Mass chromatogram of Leukotrienes and the metabolites using LC/MS/MS 1/2 無断転用禁止 Application Data Sheet for LC Application No. L2103 ■MRMクロマトグラム 20-COOH-LTB4 20-OH-LTB4 LTD4 LTE4 LTC4 LTF4 LTB4 12-Keto-LTB4 Table MRM transitions and retenstion time of Leukotrienes and the metabolites No 1 2 3 4 5 6 7 8 Name 20-COOH-LTB4 20-OH-LTB4 LTD4 LTE4 LTC4 LTF4 LTB4 12-Keto-LTB4 Q1(m/z) 365.0 351.0 495.1 438.1 624.1 567.1 335.0 333.0 Q3(m/z) 129.0 195.2 143.0 115.1 143.1 171.2 195.1 179.0 Time(min) 3.60 3.89 7.57 9.68 9.68 10.16 12.91 14.37 ロイコトリエン類の中でもアミノ酸が結合したLTC4、LTD4、LTE4、LTF4のピーク形状はカラムによってはテーリングの 起こりやすい化合物です。L-column2 ODS 2μm を使用したところ、シャープなピークを示しました。また、カラム圧 もUHPLCカラムにしては低く、今回の条件で最大50 MPaでした。 移動相は必ずろ過してからお使いください。 Saka1401 東京事業所 クロマト技術部 Chromatography Department, CERI Tokyo 2/2 〒345-0043 埼玉県北葛飾郡杉戸町下高野1600番地 / TEL: 0480-37-2601 / FAX: 0480-37-2521 / E-mail: [email protected] 無断転用禁止
© Copyright 2024