タンパク質/酵素 フナコシニュース 2014 年 10 月 15 日号(No.575) funakoshi news タンパク質/酵素 タンパク質/酵素 ブロッティング ブロッティング 1 時間で検出できるウェスタンブロットキット 迅速・高感度な蛍光ウェスタンブロットキット ONE-HOUR Western Kit シリーズ ONE-HOUR Western Fluorescent Kit [製品ページ番号:4495] 二次抗体が不要で,迅速かつ簡便な GenScript 社のウェスタ ンブロッティングキットをまとめてご紹介します。 ■ Basic Kit メンブレンと基質を除いた基本キットで,ウェスタンブロッティングに [製品ページ番号:5595] 簡便かつ迅速な操作で,約 1 時間で蛍光ウェスタンブロッティ ングができるキットです。1 つのメンブレンで複数の因子が検 出できる Multiplex Kit(#L00398)もあります。 必要なバッファー,試薬が含まれます。 特 長 ■ Standard Kit ONE-HOUR Western Basic Kit にニトロセルロースメンブレンと化学 ● 発光基質をセットにした製品です。 の一次抗体に適用可能です*。 ■ Standard Kit, using TMB 16 任意の動物種(#L00398 は Rabbit,Mouse,Goat のいずれか) ● ONE-HOUR Western Basic Kit に ニ ト ロ セ ル ロ ー ス メ ン ブ レ ン と TMB 基質をセットにした製品です。 高感度,低バックグラウンドで再現性の高い結果が得られます。 * 一次抗体の動物種に対応した蛍光標識二次抗体を別途ご用意下さい。 120 80 60 ■ Advanced Kit 上記の ONE-HOUR Western Kit と比べてさらに高感度,低バックグ α-Tubulin β-Actin 40 ラウンドで検出可能な製品です。 GAPDH GST 20 操作方法概略 One-HOUR M 5.0 2.5 1.2 0.6 0.3 0.16 0 Hela Cell Lysate (μg) 0 1.6 3.1 6.2 12.5 25 50 GST (ng) 従来法 Western Multiplex Fluorescent Kit(#L00398)を用いて,LI-COR Odyssey Infrared Imaging System でα -Tubulin,β-Actin,GAPDH(以上 700 nm で検出)および GST タンパク質(800 nm で検出)を検出した。 1. 前処理 本 紙 に 掲 載 さ れ て い る製品はすべて研究用です お問い合わせ先 試薬 - 684 1 - 620 - 684 1 - 775 TEL 03 5 FAX 03 5 : ブロッキング 操作方法概略 2. 一次抗体反応 3. 洗浄 4. 検出 1. ゲルからメンブレンに目的タンパク質をトランスファーする。 一次抗体反応 洗浄 2. Pretreat solution で 5 分間インキュベートする。 3. 一次抗体,二次抗体* および WB solution で 40 分間インキュベー 約 1 時間 1. Pretreat solution (Pretreat A solution+Pretreat B solution)で 5 分間インキュベート 2. 一次抗体反応 (あらかじめインキュベートした一次抗体+ WB solution) (40 分) 3. 洗浄(5 分 × 2 回) 4. 検出 トする。 二次抗体反応 洗浄 * 一次抗体と二次抗体は,あらかじめ混合してインキュベートしてお きます。Multiplex Kit(#L00398)の場合,対応する一次抗体と二 次抗体ごとにそれぞれ別々にインキュベートしておきます。 キット内容 約 4.5 時間 包装 / 価格(¥) Western Basic Kit, ONE-HOUR (5 assays) GSC L00204 1 kit / B C Rabbit GSC L00205 1 kit / B C Mouse Western Standard Kit, ONE-HOUR (5 assays) GSC L00204C 1 kit / B C Rabbit GSC L00205C 1 kit / B C Mouse Western Standard Kit, using TMB, ONE-HOUR (5 assays) GSC L00204T 1 kit / B C Rabbit GSC L00205T 1 kit / B C Mouse Western Advanced Kit, ONE-HOUR (5 assays) GSC L00241 1 kit / B C Rabbit GSC L00242 1 kit / B C Mouse 141015s_p16_k_i.indd 16 5. 蛍光イメージングシステムで検出する。 検出 品 名 メーカー 商品コード 4. Wash solution で 10 分 ×3 回洗浄する。 10,000 10,000 ● Pretreat solution A/B ● WB-1 solution ● WB-2 solution(#L00397 のみ) ● Wash solution ● WB-M solution(#L00398 のみ) ※ メンブレン,一次抗体および蛍光標識二次抗体は含まれていません。 別途ご用意下さい。 13,000 13,000 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) 13,000 13,000 Western Fluorescent Kit, ONE-HOUR (10 assays) GSC L00397 B C GSC L00398 B C Multiplex 1 kit / 1 kit / 21,000 25,000 21,000 21,000 2014/09/29 15:37:20
© Copyright 2024