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2014 年 1 月 22 日 制定
Code.No 16004181
中空ーリポソーム抗体ラベリングキット
[はじめに]
リポソームは、様々な物質を内包させることができ、生体内の標的
部位に物質を送達することのできるキャリアーとして知られています。近年、
リポソーム表面に認識プローブを結合させて標的部位をアクティブにター
ゲティングする技術は、特にライフサイエンス分野やドラッグ・デリバリー・シ
ステム（DDS）の分野で活発に開発されています
1～5）
。
中空リポソーム 抗体ラベリングキットは、脂質二重膜から構成されるリ
ポソームの表面に架橋剤を介して、抗体を結合させることのできるキット
です。
別売のアドリアマイシン-リポソーム抗体ラベリングキット
(Code.No16004141)、オキザリプラチン-リポソーム抗体ラベリングキッ
ト (Code.No.16004131)、クルクミン-リポソーム抗体ラベリングキット
(Code.No.16004151)、シスプラチン-リポソーム抗体ラベリングキット
(Code.No.16004121)、金コロイド-リポソーム抗体ラベリングキット
(Code.No.16004161)を用いた薬効評価の際、リポソームの脂質成
分の影響を確認する為のコントロールとして、ご使用頂けます６～７）。
[抗体のラベリング方法：リポソーム溶液 (1mL)]
1. 粉体Ａに精製水を 500μL 添加して溶解する(①液)。(用時調製)
2. リポソーム溶液 1mL に①液 50μL を添加して、室温で 2 時間撹拌
する。
3. 遠心限外濾過フィルター （NMWL,Da: 30,000）を用いて脱塩を行
う。100～200μL に濃縮し、溶液Ａを加えて 1 mL とする。この操
作をもう一度繰り返す。
4. リポソーム 1 mL に対し 2 mg/mL の抗体溶液(*1)を 50μL 添加
して室温で２時間反応させる。抗体結合反応時の抗体濃度は約
0.1mg/mL(*2)となる。
5. 溶液Ｂを 40μL 添加し、室温で 2 時間撹拌する。
6. 遠心限外濾過フィルター（NMWL,Da: 300,000）を用いて、
[特徴]
100～200μL に濃縮し、溶液Ｃを加えて 1 mL とする。この操作を
1. ５種類の脂質成分(DPPC/DPPE/DCP/Cholesterol/GM3)で
もう一度繰り返す。
構成されています。
2. リポソームの平均粒子径は約 80～150nm です。
3. リポソームへの抗体付加を容易に行うことができます。
7. 0.45μm 濾過フィルターで濾過をする。使用まで冷凍を避けて遮光
下、冷蔵保管する。
4. リポソーム表面は負電荷を帯びています。そのため、血管壁や血中の
各種タンパク質との非特異的な吸着を抑える効果が期待できます。
5. リポソーム表面は親水性化処理を施しています。免疫系細胞の貪
食を抑える効果が期待できます。
6. 1 年間の保管が可能です。
(*1) 抗体をご準備頂く際、抗体溶液中に１級アミノ基を有する物質
を含有しないことを確認下さい。１級アミノ基が存在するとリポソームと抗
体の反応が阻害される可能性があります。抗体の溶解液は、生理食塩
水、リン酸緩衝液、炭酸緩衝液等をお奨めします。
[キットの内容]
リポソーム溶液 : 1 mL ×2
(*2) 抗体の終濃度は、0.1～0.4mg/mL の範囲でご検討下さい。
粉体Ａ : 10 mg ×2
溶液Ａ : 2 mL ×2
溶液Ｂ : 2 mL
[注意事項]
1. 粉体 A は必ず使用直前に精製水で溶解して使用して下さい。
溶液Ｃ : 2 mL ×2
2. 長時間保管する場合は、容器キャップをしっかりと閉めてください。
＊ 遠心式限外濾過フィルター(NMWL,Da: 30,000)および(NMWL, Da:
300,000)をご準備下さい。
推奨製品
・Amicon Ultra-4
(NMWL, Da: 30,000)
3. 凍結を避けて保管して下さい。
4. 濾過滅菌を行っております。防腐剤等は添加していません。
MILLIPORE : 型番 UFC8 030 08 : 8 本入り
・Centricon YM-30 (NMWL, Da: 30,000)
MILLIPORE : 型番 4242AM : 8 本入り
・Microcon YM-30 (NMWL, Da: 30,000)
MILLIPORE : 型番 42422 : 8 本入り
・VIVASPIN (NMWL, Da: 300,000)
Sartorius : 型番 US2052 : 48 本入り
[保管]
遮光下、2～10℃で保管
[参考文献]
1.
M. Hirai, H. Minematu, N. Kondo, K. Oie, K. Igarashi,
N. Yamazaki, Accumulation of liposome with Sialyl
Lewis X to inflammation and tumor region:
Application to in vivo Bio-Imaging, BBRC 353 (2007)
553-558.
2.
M. Hirai, K. Oie, K. Igarashi, In vivo imaging reagent
using liposome with sugar chain, MSD 33 (2007)
826-828
3.
N. Hashida, N. Ohguro, N. Yamazaki, Y. Arakawa, Eiji
Oiki, H. Mashimo, N. Kurokawa, Y.Tano, High-efficacy
site-directed drug delivery system using sialyl-Lewis
X conjugated liposome, Experimental Eye Research
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4.
J. Minaguchi, T. Oohashi, K. Inagawa, A. Ohtsuka,
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Lewis X conjugated liposome in inflamed joints of
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Shinohara, H. Okamura, and M. Namba, Role of
Macrophages in the development of pancreatic islet
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M.Hirai, Y. Hiramatsu, S. Iwashita, T. Otani, L. Chen, Y.
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7.
M. Hirai, H. Minematsu, Y. Hiramatsu, H. Kitagawa, T.
Otani, S. Iwashita, T. Kudoh, L. Chen, Y. Li, M. Okada,
D. S. Salomon, K. Igarashi, M. Chikuma, M. Seno,
Novel and simple loading procedure of cisplatin into
liposomes and targeting tumor endothelial cells,
International Journal of Pharmaceutics 391 (2010)
274-283.
[製造元]
大阪府箕面市稲４丁目１番７号
TEL: 072-749-3020