カタログコード: m-EC ブイヨン m-EC BROTH OXOID コード:CM0990 2 CULTURE MEDIA E 組成(培地1Lあたり) の直接増菌に使用される1)。ノボビオシンは一次増菌培地の 選択性を高めるために添加してもよい。組成中には緩衝乳糖 ブイヨン及び Szabo 2) らの推奨に基づく低濃度の胆汁酸塩 トリプトン ……………………………… 20.00 g 乳糖 ………………………………………… 5.00 g No.3を含有する。低濃度の胆汁酸塩は芽胞形成菌や腸球菌 胆汁酸No.3 ……………………………… 1.12 g の発育を阻害するが、37℃でE. coliO157の発育は阻害しな リン酸水素二カリウム …………………… 4.00 g リン酸二水素カリウム …………………… 1.50 g 塩化ナトリウム …………………………… 5.00 g い。Okrendが提案した37℃(低温)でノボビオシンサプリ メント( SR181 )(最終濃度 20mg/l )を添加した場合、 E. coliO157の発育を抑制することなく共雑菌を抑制できる3)。 pH 6.9±0.2 E 方法 ノボビオシン選択サプリメント(SR181) 1バイアルあたり:500mL用 ノボビオシン …………………………… 10.00 現 在 、用 い ら れ て い る 1 つ の 方 法 は 次 の 通 り で あ る mg (Okrend3)に基づく)。10倍希釈した検査材料を本培地に添加 し、ノボビオシンサプリメントを加える。ストマッカーで2分 間ストマッキングする。37℃で6時間、100rpmで振盪培養を E 調製方法 本品 18.3g を 500mL の精製水に溶解し、 121 ℃で 15 分間、 高圧蒸気滅菌する。溶解したノボビオシン選択サプリメント (SR181)を1バイアル添加する。 行うか、35℃で24時間、静置培養を行う。培養後、振盪培養 を行ったものは 10-2倍希釈、一昼夜培養したものは 10-6倍希 釈する。適当な選択寒天培地に塗沫する(例:ソルビトールマ ッコンキー(CM813)やBCIG加ソルビトールマッコンキー。 選択性を上げるため CTサプリメント( SR172)を添加すると 良い)。 37℃で24時間、培養を行うとE. coliO157は白色のコロニ E 用途・特徴 ノボビオシンはStaphylococcus aureus(メチシリン耐性株 を含む)や他のブドウ球菌のようなグラム陽性菌に対し有効 ーを呈する。E. coliO157は、大腸菌O157検出キット「UNI」 やドライスポットE. coliO157(DR120)で確認する。検査 方法は参考文献を必ず参照すること。 な抗生物質である。Haemophilus influenzae、Neisseria 属及 本培地とノボビオシンサプリメント(SR181)は びProteus 属のある種を含めた一部のグラム陰性菌もまたノ USDA/FSIS 4) と AIFST 1) により獣肉や食鳥肉製品中の E. ボビオシンに対し感受性を示すが、大部分の腸内細菌は耐性 coliO157:H7やE. coliO157:NMを検出する選択増菌培地 である。ノボビオシンは主として細菌の発育を抑制するが、 に推奨されている。 高濃度ではより感受性の高い菌に対し殺菌的に作用する事も ある。ノボビオシンは主にDNA合成を阻害する(RNA合成 も阻害するが、その程度はより低い)。DNAにおけるその作 用は、特にジャイラーゼβサブユニットに ATP が結合する E 品質管理 のを選択的及び競合的に阻止することに関係する。ジャイラ 陽性コントロール ーゼはループ状の2重らせんDNAから負の超らせんを導入す Escherichia coli O157 NCTC12900(非病原性) る酵素であり、低濃度のノボビオシンにより阻害される。し かし、ノボビオシン耐性E. coliは薬剤により影響されないジ ャイラーゼを有する。ノボビオシンはまた蛋白や細胞壁合成 も阻害する。 m-ECブイヨン(胆汁酸塩が減量されている)は、食品及 び環境試料(特に亜致死損傷を受けた冷凍食品中の菌)から 2 ─ 122 m-EC ブイヨン 陰性コントロール Staphylococcus aureus ATCC25923 E 注意 使用期限を過ぎたものや劣化が見られるものは使用しない こと。 E 参考文献 1. Desmarchelier, P. M. and Grau, F. H. (1997) Escherichia coli. In: Foodborne Microorganisms of Public Health 2 Significance. 5th Edition. pp.231-264.A. D. Hocking (Ed.). CULTURE MEDIA AIFST (NSW Branch) Food Microbiology Group, Australia. 2. Szabo, R. A., Todd, E. C. D. and Jean, A. (1986) J. Food Prot. 49: 768-772 3. Okrend, A. J. G., Rose, B. E. and Bennett, B. (1990) J. Food Prot. 53: 249-252 4. UDSA/FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 3rd Ed. (1998) Chapter 5. Detection, Isolation and Identification of Escherichia coli O157:H7 and O157:NM (NonMotile) from Meat and poultry Products. m-EC ブイヨン 2 ─ 123
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