タンパク質/酵素 フナコシニュース 2014 年 7 月 1 日号(No.568) funakoshi news NEW タンパク質/酵素 定量 NEW Kindle Biosciences, LLC メーカー名: Kindle Biosciences 社 は 米 国 に 本 拠 を 置 き,Liquid Phase Immunosandwich Assay という,タンパク質測定アッセイ系を 構築するキットを開発しているメーカーです。 3. 反応溶液 5 ∼ 8 μl を,KwikQuant カセットのストリップ末端にア プライし,Cell wash buffer 50 μl を卵型のウェルにアプライする。 15 分間静置し,溶液を反対側の末端まで拡散させる。 4. ストリップの検出ゾーンを溶液が通過すると,ゾーンに固定された ストレプトアビジンに,ビオチンを介して先の複合体が結合する。 5. UV トランスイルミネーターまたは DNA ゲルイメージャーで,免疫 反応複合体の蛍光を測定し,Image J などの画像解析ソフトで解析 する。蛍光強度は,測定因子の濃度に相関する。 URL:http://kindlebio.com/ KwikQuant アッセイとウェスタンブロット・ELISA の比較 迅速(15 ∼ 45 分)にタンパク質を測定するキット KwikQuant Assay Kit [製品ページ番号:8684] NEW 18 新 し い タ ン パ ク 質 測 定 ア ッ セ イ 系 Liquid Phase Immunosandwich Assay により,迅速(15 ∼ 45 分) ・簡 便(3 ステップ操作) ・正確に,目的タンパク質を検出するキッ ト で す。2 種 類 の 抗 体 で 目 的 因 子 を サ ン ド イ ッ チ し, KwikQuant カセットにて目的因子を蛍光検出します。測定さ れる蛍光強度は,試料中の目的タンパク質濃度と相関します。 特 長 KwikQuant アッセイ ウェスタンブロット ELISA アッセイ時間 15 ∼ 45 分 4 ∼ 8 時間 3 ∼ 5 時間 操作ステップ 3 回,簡便 複数回,煩雑 複数回,煩雑 測定機器 DNA ゲルイメージャー フィルムスキャナー プレートリーダー 感 度 1 ∼ 100 pg/ml 1,000 ∼ 100,000 pg/ml 1 ∼ 100 pg/ml 試料容量 1 ∼ 3 μl 5 ∼ 20 μl 50 ∼ 200 μl KwikQuant の使用例 assay # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 assay # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 KwikQuant Assay により,hCG 量を定量した。 上図:hCG を PBS with 5% bovine serum に段階希釈した結果 下図:hCG を neat bovine serum に段階希釈した結果 Lane1, 2:0 pg/ml Lane11, 12:222 pg/ml Lane3, 4:3 pg/ml Lane13, 14:667 pg/ml Lane5, 6:8 pg/ml Lane15, 16:2,000 pg/ml Lane7, 8:25 pg/ml Lane17, 18:6,000 pg/ml Lane9, 10:74 pg/ml 本 紙 に 掲 載 さ れ て い る製品はすべて研究用です お問い合わせ先 試薬 - 684 1 - 620 - 684 1 - 775 TEL 03 5 FAX 03 5 : 品 名 特 長 ● ビオチン標識抗体とユウロピウム標識抗体のペアを用いて,迅速か つ正確に,タンパク質を検出するシステムです。 ● アッセイ系の構築は,ELISA などのほかのアッセイ系の構築に比べ, 非常に簡便です。 ● 市販の ELISA 構築抗体セットを,KwikQuant アッセイに応用する ことも可能です ● *1 。 精製マウスモノクローナル抗体,マウス腹水,精製/未精製ポリク ローナル抗体が使用できます。 ● 濃度既知のスタンダードを用いて検量線を作成することもできます。 ● 測定試料:血清,血漿,組織抽出物,細胞抽出物,細胞培養上清* 2 ● 測定波長:615 nm ※測定感度は,検出に用いる抗体の性能に依存します。 * 1 R&D Systems 社の ELISA 構築用試薬セット DuoSet Kit(製品ページ 番号:8389)に含まれる,目的因子に対する未標識抗体,ビオチン標 識抗体,スタンダードも応用できます。 * 2 0.5%以上の SDS,Triton X-100,Tween 20 などの界面活性剤を含 む試料は使用できません。 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) KwikQuant Assay Cassette Kit NEW KIB K1 1 kit / 17,000 ■ 抗体標識キット お手持ちの抗体ペアに,ビオチンおよびユウロピウムをそれぞれ標識す るキットです。約 200 回分の検出に必要な抗体を標識することができ ます。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) KwikQuant Antibody Labeling Kit NEW KIB K2 B 1 kit / Check it out ! 21,000 [メーカー:KIB] KwikQuant アッセイ解説動画 [製品ページ番号:8684] KwikQuant Assay Kit の概要や特長,方法をご紹介している 動画です。ぜひご覧下さい。 Movie 測定原理 1. 測定因子をサンドイッチさせる抗体ペアを用意し,片方をビオチン 標識,もう片方をユウロピウム標識する。 2. ビオチン標識抗体,ユウロピウム標識抗体,測定試料を混合し,5 ∼ 15 分間インキュベートして,測定因子と抗体の免疫反応複合体を形 成する。 140701s_p18_k_i.indd 18 2014/06/17 16:31:19
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