CST Beads Laserの使用本数かかわらず実行してください 共同実験室推奨・メーカー非推奨 精度管理2 0.Sort Speedを選択する BD社 カタログ No. 341319(50TEST) 製品名:BD Cytometer Setup and Tracking Beads 容量:3mL シース液 0.5mLをチューブ(約0.5cm) に分注し、CSTビーズを1滴滴下して撹拌します。 70umノズル 70umノズル 100umノズル 1.フォルダーを開く ***ーーーAria QCーーーRainbow CST Beads User 2.使用するMode に対応した Hi or Med or Low の Experimentを開く 右クリック、open Experiment 注意 Experiment内の最後のTubeを必ず、クリックしてください。 クリックしないと、測定モードになりません 3.Laserを選択 (その他変更不要です。) 4.Area Scalingを全て1.00にする 5.Window Extensionを0.00にする。 6.サンプルをセットし、 キャップは、外すこと(修理代1.5万円) を押す。 7.Events To Record 5000evt 8.Events To Display 500evt ③ ① ② ④ タイピングする。 9. Ev e nt Rat e を 300event/sec 前後になるようにFlow Rateを 1.0~2.0 の範囲で調整する 注意:parameters値は、変更しない。 10.ビーズ集団にゲートを移動する Red Laser使用時 2つの集団をgateする Violet Laser使用時 一番左の山が見えるように調整(10E2付近に調整) 11. 山を3つ出す(Red/Violets使用時) <Blueのみの場合はFSC/SSCにDotが表示されたらRecord> 調整Delay値をクリックし、キーボードの↑↓で、ゆっくり調整 一番左の山が見えるように調整(10E2付近に調整) (3山が、全体が左に出るように。 Mean値最大・CV6以下 初期設定 HI MED Blue 0.00 0.00 Red -36.00 -54.00 Violet 36.00 54.00 LOW 0.00 -40.00 40.00 12.Window Extension を、 2.00 にする ① ② Next Tubeを押す Recordを押す。(over Writeしないこと) Over write場合は、再度Nextを押してください。 13.Record終了後 を押し、サンプルを取り出す。 Nameは、yymmdd-ノズルNo。でお願い 付録 CSTに関する参考資料(個人的な見解です。間違えていたらごめんなさい 注)蛍光表示は、全てLogスケールです。 全てのパラメーターでのPeakパタンです。 もっと面白いこと出来そうなので、情報ありましたら教えてください。 無蛍光(nega)2umのピーク 機器に異常がある場合下がる?? 3umのピーク 機器に異常がある場合下がる?? 蛍光標識ピーク ビーズが古くなるとピークが下がります。 ③ ② ① ・3つピークが出ない場合、機械的な故障が考えられますので、共同実験室に連絡下さい。 ・①ピークが無い場合、感度が落ちている可能性がありますので注意してください・ (フローセルの汚れ・レーザー光路の汚れの可能性があります。) ・③ピークは、ビーズが古くなると、下がります。 ・Diva V6.0以降は、自動の機器調整があります。 (3つ存在してるのは、3本の間隔を数値化して、精度を見ているようです。)
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