High-Salt Precipitation So High-Salt Precipitation

High-Salt
High-SaltPrecipitation
PrecipitationSolution
So
Code
CodeNo.
No.313-06341
313-06341 50
50mlml
Ⅰ 製品説明
マニュアル(第 2 版)20140709HT
Ⅴ 使用方法
本 品 は ISOGEN、ISOGEN-LS によってポリサッ
カライド、プロ テオグリカ ン、グリコーゲ ンなどを多 く
核 酸 溶 液 (500 µl )
250 µl
含 む試 料 から RNA を抽 出 する際 に、それら夾 雑
High-Salt Precipitation Solution
( 核 酸 溶 液 の 1/2 容 量 )
物 の混 入 をより効 果 的 に抑 えるために使 用 する溶
軽く転倒混和
液 です。
250 µl
また、ISOPLANT や ISOPLANT Ⅱなど、他 の核
Isopropanol
( 核 酸 溶 液 の 1/2 容 量 )
酸 抽 出 キ ッ ト に も 同 様 の 目 的 で使 用 す る こ とが で
軽く転倒混和
きます。
5 - 15 分 間
室温で静置
遠 心 ( 10 K×g, 15 分 間 ) *
Ⅱ 組成
上清を捨てる
1.2 mol/l NaCl,0.8 mol/l Sodium citrate
沈
殿
(オートクレーブ済 み,DNase フリー,RNase フリー)
1 ml
70% エ タ ノ ー ル
軽く混合
Ⅲ 保存方法
遠 心 ( 7.5 K×g, 5 分 間 )
室温保存
沈
殿
沈殿を風乾
Ⅳ 使 用 上 の注 意
1.
ddH 2 O,TE(pH8.0) で 溶 解
本 品 は 試 験 研 究 用 試 薬 ですの で、 医 薬 品 、
その他 の目 的 にはご使 用 になれません。
2.
* 12 K× g の場 合 は、遠 心 時 間 を 8 分 間 に 短 縮 可 能 です。
本 品 の 取 扱 い は 、 マ ニ ュア ル 記 載 内 容 通 り
に行 ってください。 マニュアル記 載 内 容 と異
3.
核酸溶液(精製後)
Ⅵ
参考文献
なっ たお 取 り扱 いに よるト ラ ブルに つきま して
Chomczynski, P. and Mackey, K. : BioTechniques,
は、弊 社 では責 任 を負 いかねます。
19, 492-495(1995).
低 分 子 RNA の回 収 の場 合 、本 品 のご使 用
関 連 製 品 や実 験 例 などその他 詳 細 については
はお勧 めしません。かえって収 量 が低 下 する
ニッポンジーンのホームページをご覧 下 さい。
こ と が あ りま す 。 ( 詳 細 は ニ ッ ポ ン ジ ー ン の
ホームページをご参 照 ください。)
株 式 会 社 ニッポンジーン 遺 伝 子 工 学 研 究 用 試 薬
http://www.nippongene.co m/
株式会社ニッポンジーン
〒930-0834 富山市問屋町 1-8-7 TEL 076-451-6548
URL http://www.nippongene.com/
FAX 076-451-6547
Ⅶ 使用例
①
ISOGEN を用 いた RNA 抽 出 の場 合
②
ISOPLANT を 用 い た DNA 抽 出 の 場 合
サンプル
サンプル
1 ml
300 µl
ISOG EN
溶解またはホモジナイゼーション
室温
5 分間
200 µl
SolutionⅠ
ボ ル テ ッ ク ス ( 1 ~2 秒 )
150 µl
放置
SolutionⅡ
ボ ル テ ッ ク ス ( 5 ~6 秒 間 )
Chloroform
イ ン キ ュ ベ ー シ ョ ン ,50℃ ,15 分 間
15 秒 間 、 激 し く 混 合
150 µl
室温
2 - 3 分間
放置
遠 心 ( 4℃ , 12 K×g, 15 分 間 )
水
SolutionⅢ
ボ ル テ ッ ク ス ( 1 ~2 秒 )
氷 上 ,15 分 間
相 ( 500 µl )
遠 心 ( 4℃ , 12 K×g, 15 分 間 )
250 µl
Isopropanol
250 µl
High-Salt Precipitation Solution
水
相
2~2.5 倍 量 エ タ ノ ー ル
転倒混和
5 - 15 分 間
混合
遠 心 ( 4℃ , 12 K×g, 10 分 間 )
室温で静置
遠 心 ( 4℃ , 12 K×g, 8 分 間 )
沈
沈
殿
( ゼ ラ チ ン 状 の DNA の 場 合 は 以 下 の 操 作 を 行 う )
殿
1 - 1.5 ml
TE ま た は H 2 O に て 溶 解 (500 µl)
70% エ タ ノ ー ル
250 µl
軽く混合
High-Salt Precipitation Solution
(溶 解 液 の 1/2 容 量 )
遠 心 ( 4℃ , 7.5 K×g, 5 分 間 )
十分に撹拌
沈
殿
250 µl
沈殿を風乾
Isopropanol
(溶 解 液 の 1/2 容 量 )
ddH 2 O,TE (pH8.0) or 0.5 % SDS で 溶 解
撹拌
total RNA 溶 液
直 ち に 遠 心 ( 4℃ , 10 K×g, 15 分 間 )
沈
殿
注 ) 低 分 子 RNA の回 収 の場 合 、本 品 のご 使 用 はお勧 め
1 ml
しません。かえって収 量 が低 下 するこ とがあります。
遠心
沈
70% エ タ ノ ー ル
殿
乾燥
TE (pH8.0)
DNA 溶 液
株式会社ニッポンジーン
High-Salt Precipitation Solution マニュアル(第 2 版)20140709HT